Expressão dos genes Receptor Pregnano X (PXR), Citocromo P4503A (CYP3A) e resistência a multidrogas 1(MDR1) em fígado de peixe-zebra (Danio rerio)

Abstract

O receptor pregnano X (PXR) é um receptor nuclear envolvido na regulação transcricional de enzimas envolvidas no metabolismo de fármacos e também de proteínas transportadoras. Em mamíferos, vários xenobióticos induzem a expressão dos genes do citocromo P4503A (CYP3A) e de resistência a multidrogas 1 (MDR1) através da via de sinalização do receptor PXR. Pouca atenção tem sido dada aos estudos sobre a identificação da função biológica dos homólogos do PXR em espécies de não-mamíferos. O peixe-zebra tem se tornado amplamente utilizado e aceito como espécie modelo em estudos toxicológicos e farmacológicos no entendimento dos mecanismos de doenças humanas e na identificação de vias de sinalização conservadas. O objetivo desse estudo foi avaliar a expressão in vivo dos genes PXR, CYP3A e MDR1 no fígado de peixes-zebra tratados com o esteróide sintético pregnenolona 16a-carboninitrilo (PCN), o antimicótico sintético clotrimazol (CTZ) e o composto fármaco nifedipina (NIF). Peixes (n=15 por grupo) foram expostos à PCN, CTZ e NIF (20 mg.Kg-1) por 48 horas. Os fígados foram retirados e utilizados para a extração do RNA total (n=5 por grupo). A partir do cDNA obtido foi realizada a reação de PCR, utilizando diferentes iniciadores para a amplificação de PXR, CYP3A, MDR1 e ß-ACTINA. Fígados de peixes tratados com PCN mostraram uma indução de 1,9 vezes na indução do PXR seguida de 1,8 vezes na indução do CYP3A e de 1,6 vezes na indução do MDR1 nos níveis de mRNA. CTZ e NIF não afetaram estatisticamente a expressão dos genes PXR, CYP3A e MDR1. O padrão similar na expressão do mRNA dos genes PXR, CYP3A e MDR1 encontrado em peixes tratados com diferentes indutores de PXR sugere que a associação intrínseca entre esses três genes é conservada no peixe-zebra.