Aplicação de PCR-RFLP na região do Exon 6 do gene do IGF-I em animais da raça Crioula Lageana.

Abstract

O fator de crescimento semelhante à insulina (IGF-I) está relacionado com a precocidade sexual e está presente em diferentes estágios da foliculogênese, agindo diretamente ou indiretamente no desenvolvimento folicular. O IGF-I é um candidato a marcação molecular devido a sua relação com características de interesse econômico, e pode ser usado em programas de melhoramento genético como uma ferramenta na seleção assistida. O presente estudo teve como objetivo identificar a possível existência de polimorfismos no gene do IGF-I em animais da raça Crioula Lageana, utilizando a técnica de reação em cadeia da polimerase (PCR) e o polimorfismo no comprimento do fragmento de restrição (RFLP). Foram coletadas amostras de pelo de 70 animais em fazendas localizadas em Lages/SC. As análises foram realizadas no Laboratório de Ensino e Pesquisa em Genética – LEPGA da Universidade Federal de Santa Catarina em Florianópolis. As amostras de folículos pilosos foram submetidas à extração de DNA pelo método de PCI (fenol-clorifórmicoálcool-isoamílico) adaptada, e o DNA genômico extraído foi quantificado e amplificado mediante a PCR. Para verificar o resultado da reação de amplificação, as amotras foram submetidas à eletroforese e o fragmento obtido foi submetido à técnica de PCRRFLP utilizando-se as enzimas BamHI e XmnI. Observou-se que a extração de DNA e a realização da técnica de PCR e PCR-RFLP funcionaram. Os resultados mostram que a região estudada é monomórfica para os sítios de corte das enzimas BamHI e XmnI no gene do hormônio IGF-I dos animais avaliados. Sugerem-se que estudos posteriores com endonucleases diferentes e outras regiões (exons) do gene IGF-I a fim de buscar polimorfismos na população da raça Crioula Lageana.