Estudo dos efeitos antitumorais de chalconas sintéticas em células de glioblastoma humano

Abstract

Os gliomas são neoplasias do SNC que podem afetar tanto o cérebro quanto a medula espinhal. A OMS classifica os gliomas em diferentes graus (I-IV) conforme sua histopatologia, sendo o glioblastoma multiforme (GBM) a forma mais agressiva (IV), e o tumor primário mais comum entre os cerebrais. O tratamento padrão para pacientes com GBM recém diagnosticado é a cirurgia, seguida de radioterapia e quimioterapia concomitante e adjuvante com TMZ. Porém, apesar dos tratamentos existentes, os pacientes com GBM possuem uma sobrevida média de apenas aproximadamente 14 meses. O tratamento é ineficaz devido uma série de fatores, como por exemplo, altas taxas proliferativas, evasão da apoptose e capacidade de invasão em tecidos sadios. Deste modo é importante o estudo de opções alternativas de tratamentos mais eficientes para GBM e nessa busca estão as chalconas. As chalconas são compostos fenólicos que fazem parte da via de biossíntese de flavonoides em plantas e apresentam uma estrutura química simples e versátil. Três chalconas sintéticas (Q1VA, Q2VA e Q18VA) foram testadas em células de GBM provenientes de ressecção cirúrgica. Ensaios de viabilidade celular por MTT, morte celular (Anexina-PI), EROs (DCFDA), ??m (TMRE), ciclo celular (PI) e migração (scratch would healing) foram realizados para verificar o efeito como uma possível substância antitumoral. Foi identificado que apenas uma chalcona (Q1VA) possuí citotoxicidade, e que a mesma aumentou os níveis de apoptose sem aumentar os níveis de necrose. Nesse sentido, a morte celular poderia estar ocorrendo via mitocôndria, pois a Q1VA tem a capacidade de despolarizar a membrana mitocondrial. Essa perda do ??m poderia ser em decorrência do acréscimo nos níveis de EROs que foram observados nas 6 primeiras horas de tratamento. As células que permaneceram viáveis, apresentaram atraso no ciclo celular, na fase M, principalmente. Do mesmo modo, a Q1VA impediu as células de GBM de migrarem.

Abstract: Gliomas are neoplasms from central nervous system that affect both the brain and the spinal cord. The World Health Organization classified Gliomas into different grades (I-IV) according to their histopathological characteristics, being the glioblastoma multiforme (GBM) the most aggressive form (IV) and the most common malignant primary brain tumor. The standard treatment for patients with newly diagnosed GBM is surgery, followed by concomitant and adjuvant TMZ plus radiotherapy. Despite the treatments, the average survival time of patients with GBM is approximately 14 months. The treatment is feckless because of many factors such as high proliferative rates, evasion of apoptosis and ability invasion in healthy tissues. Thus, it is important to study alternative treatment options for GBM, such chalcones. Chalcones are natural compounds that are part of biosynthesis flavonoids pathway in plants and have a simple and versatile chemical structure. Therefore, the aim of this study was to determine the anticancer activities of chalcones on GBM cells. Three synthetic chalcones (Q1VA, Q2VA e Q18VA) were used against GBM cells from surgical resection. Viability assay by MTT, cell death (Anexine-PI), ROS (DCFDA), ??m (TMRE), cell cycle (PI) and scratch would healing were investigated. It was identified that only one chalcone (Q1VA) has cytotoxicity and that has increased levels of apoptosis without increasing levels of necrosis. In this sense, GBM could be dying via mitochondria, since Q1VA has the ability to depolarize the mitochondrial membrane. This loss of ??m could be due to the increase in the levels of ROS that were observed in the first 6 hours of treatment. Cells that remained viable were delayed in the cell cycle,in phase M, mainly. Likewise, Q1VA prevented GBM cells from migrating.