Análise de diferentes perfis de pacientes em relação à expressão de genes envolvidos com a maturação oocitária e o desenvolvimento embrionário inicial

Abstract

A fertilidade da mulher é um tópico que tem concentrado discussões ao redor do mundo, uma vez que muitos fatores estão envolvidos no seu declínio, dentre eles o perfil e hábitos comportamentais adotados. As causas de infertilidade são diversas e em grande parte estão envolvidos os fatores ovarianos, com comprometimento da qualidade oocitária. Cada oócito está envolto pelas células do cumulus, que respondem a estímulos hormonais e comunicam-se de forma bidirecional com oócito, promovendo sua maturação. Essas células expressam genes que participam de vias metabólicas e, a análise de sua expressão gênica em diferentes perfis de pacientes pode ser uma importante ferramenta para a busca de marcadores da maturação e qualidade oocitária. Esse trabalho teve como objetivo analisar se o perfil de idade e IMC, e hábitos comportamentais de tabagismo e consumo de álcool da mulher estariam influenciando a expressão dos genes PTGS2, AREG, CYP19, CSE, FGF2, FGF18, e o desenvolvimento embrionário inicial em laboratório. Pacientes submetidas a protocolo de estimulação ovariana e fertilização in vitro tiveram suas células do cumulus coletadas, e a expressão de cada gene foi mensurada através de RT-qPCR. As médias de expressão de cada gene foram calculadas de acordo com a diferença de perfil e/ou hábitos comportamentais que apresentavam. Foram comparadas nestes mesmos grupos as taxas do desenvolvimento embrionário inicial no laboratório. Pacientes com mais de 35 anos apresentaram menor expressão de PTGS2 e de CSE do que pacientes com idade menor ou igual a 35 anos. Foi encontrada diferença nas médias de expressão dos genes PTGS2, CYP19 e FGF2, onde mulheres que consomem álcool expressaram menos estes genes quando comparadas àquelas que não consomem álcool. Combinando-se diferentes perfis e hábitos comportamentais, todos os genes analisados apresentaram maior nível de expressão em pacientes que não consomem álcool e nunca fumaram do que em pacientes que consomem álcool e/ou já fumaram/fumam. Já a expressão dos genes CYP19 e CSE foram maiores no grupo combinado de mulheres com idade menor ou igual a 35 anos e IMC menor ou igual a 25 kg/m2 em relação a mulheres com idade maior que 35 anos e/ou IMC maior que 25 kg/m2. A taxa de oócitos maduros coletados foi diferente, sendo menor em ciclos de pacientes com idade maior que 35 anos e/ou IMC maior que 25 kg/m2 em relação às pacientes com idade menor ou igual a 35 anos e IMC menor ou igual a 25 kg/m2. Os resultados deste trabalho sugerem que o perfil e hábitos comportamentais da mulher podem influenciar a expressão de genes importantes para a maturação oocitária, bem como o desenvolvimento embrionário inicial.

Abstract: Women's fertility is a current topic that has leading discussions around the world, since many factors are involved in its decline, among them the profile and behavioral habits adopted. Regarding female infertility, there are ovarian factors, concerning oocyte quality and ovulatory processes. Inside the ovaries, each oocyte is surrounded by cumulus cells and, throughout hormonal stimuli, there is bidirectional communication with the female gamete, promoting its maturation and ovulation. These cells express genes that are inserted in several metabolic pathways and therefore the analysis about gene expression in different patient profiles can provide important information for studies regarding markers for oocyte quality and maturation. The present work aimed to analyze if the woman profile and her behavioral habits would be influencing the expression of genes involved in oocyte maturation, such as PTGS2, AREG, CYP19, CSE, FGF2, FGF18, and the initial embryonic development in the laboratory. Patients submitted to ovarian stimulation protocol and in vitro fertilization had their cumulus cells collected, and the expression of each gene described above was measured by RT-qPCR. Expression mean of each gene was calculated and compared, according to the difference of profile and/or behavioral habits that they have presented. Early embryonic development rates in the laboratory were also compared in these same groups. Patients aged more than 35 years old had lower expression of PTGS2 and CSE compared to patients aged less than or equal to 35 years old. Women who consume alcohol had a lower expression of PTGS2, CYP19, and FGF2 genes when compared to those who do not consume alcohol. Different profiles and behavior habits were also combined to novel analysis, and thus all studied genes have presented a higher level of expression in patients who did not consume alcohol and never smoked compared to patients who consume alcohol and/or smoke or have already smoked. Genes CYP19 and CSE have been more expressed in women aged less than or equal to 35 years old and BMI lower than or equal to 25 kg/m2 comparing to women older than 35 years and/or BMI greater than 25 kg/m2. Regarding clinical laboratory data rates during in vitro fertilization cycles of these patients, the number of mature oocytes collected was different, being lower in cycles of patients aged more than 35 years old and/or BMI greater than 25 kg/m2 compared to women aged less than or equal to 35 years old and BMI lower than or equal to 25 kg/m2. The results of this work suggest that woman profile and her behavioral habits may influence expression of crucial genes for oocyte maturation as well as the initial embryonic development.