Avaliação da viabilidade celular de Neisseria gonorrhoeae sob diferentes condições de transporte e armazenamento

Abstract

Introdução: Neisseria gonorrhoeae, agente etiológico da gonorreia, é um patógeno humano obrigatório que acomete as mucosas do trato genital inferior, reto, orofaringe, conjuntiva e em casos raros, pode evoluir para artrite gonocócica e sepse. O gonococo é considerado uma ameaça à saúde pública devido ao surgimento de cepas resistentes aos antimicrobianos de todas as classes utilizadas para o tratamento da infecção gonocócica. Dessa forma, para conter o avanço da transmissão de cepas resistentes, é necessário que os países realizem vigilância das cepas circulantes, a fim de adequar os esquemas terapêuticos nacionais. O objetivo deste estudo foi otimizar duas etapas importantes nos estudos de vigilância, que consistem no armazenamento da amostra coletada até seu processamento e no tempo e temperatura de congelamento dos isolados recuperados até seu envio para o laboratório de referência, onde são realizados os testes de sensibilidade antimicrobiana. Materiais e métodos: 15 cepas do gonococo foram armazenadas em criotubos contendo caldo casoy e glicerol e mantidas a -20 °C e -80°C por longos períodos de tempo. 4 cepas foram mantidas em dois meios de transporte comerciais por diferentes períodos de tempo. A avaliação da viabilidade celular foi realizada através de semeadura em ágar chocolate. Resultados: Após 30 dias, apenas 53% das cepas provenientes da suspensão em escala 1 de McFarland apresentaram viabilidade. Na concentração em escala 2 de McFarland, 80% das cepas permaneceram viáveis. As cepas armazenadas a -80°C se encontravam viáveis após 150 dias. No meio Amies com carvão (Copan®), observou-se viabilidade por um período mínimo de 24 h, e no meio ESwab – amies líquido (Copan®) por até 72 h. Discussão: A concentração bacteriana afetou a sobrevivência das cepas armazenadas a -20°C. O meio Amies com carvão manteve a viabilidade celular até 24 horas e o meio ESwab – amies líquido até 72 horas. O perfil fenotípico de resistência não influenciou o perfil de crescimento das cepas analisadas. Conclusão: Após 30 dias de armazenamento, grande parte das cepas armazenadas a -20°C perde a viabilidade, enquanto à temperatura de -80°C a viabilidade celular se mantém por 150 dias ou mais. O meio Amies com carvão manteve as cepas viáveis por 24 horas, e o meio ESwab - Amies líquido por 72 horas. A otimização destas etapas pode promover a participação de mais centros sentinelas nos estudos de vigilância, aumentando a representatividade das diferentes regiões do Brasil.