Determinação da atividade enzimática da catalase e tirosinase por eletroforese capilar com detecção uv/vis e espectrometria de massas

Abstract

O estudo sobre a atividade das enzimas catalase e tirosinasee a sua a utilização na área da cosmetologia,se desenvolve à medida que aumenta a busca para atingir os padrões de beleza estabelecidos pela sociedade,pois a atividade das enzimas estãorelacionadas a problemas estéticos como a hiperpigmentação da pele e a despigmentação capilar. No presente trabalho foram desenvolvidosmétodos para análise da atividade dasenzimas tirosinase e catalase utilizando eletroforese capilar acoplada a diferentes detectores. Para a atividade da tirosinase, o métodotevecomo baseo consumo da tirosina para a formação de L-dopa. Utilizaram-se dois diferentes detectores,o detector de arranjo de diodos UV-vis (DAD) e o espectrômetro de massas (CE-MS) para realizar as análises,com ambos foi possível detectar o sinal da tirosina. Fez-se uso de estratégias de injeção múltipla com o intuído de minimizar o erro de injeçãoda técnica.Foi utilizado a relação sinal-ruído para o cálculo do Limite de detecção (LOD) e quantificação (LOQ).O método utilizando o detector DAD apresentou um LOD de1,52mg L-1 e LOQde 4,56mg L-1, enquanto ométodo utilizando o detectorCE-MS apresentou um LODde 0,043mg L-1e LOQde 0,13mg L-1.Realizou-se a análise de uma amostra de cogumelo, que não apresentou atividade da enzima tirosinase. Para a atividade da catalase,o método teve como base a determinaçãodo consumo do peróxido de hidrogênio pela atividade da enzima para a formação de água e oxigênio.Utilizou-se o tetraborato de sódiopara a formação de um complexo de peroxido de hidrogêniopara a detecção direta utilizando o detector de arranjo de diodos UV-vis.Este mostrou a capacidade de detectar o sinal do peróxidode hidrogênio.Ométodo foi aplicadopara a análise de uma amostra de batata, que não apresentou atividade da enzima catalase.