Avaliação do teste colorimétrico BLUE-CARBA com inibidores enzimáticos para detecção de metalo-beta-lactamases

Abstract

Métodos fenotípicos para detecção de carbapenemases de baixo custo, que apresentem facilidade na execução e rapidez no tempo de resposta são extremamente necessários na rotina de laboratórios de Microbiologia da área hospitalar. Neste trabalho foi avaliado o método colorimétrico BLUE-CARBA com adição de inibidores enzimáticos ácido etilenodiaminotetracético dissódico (EDTA) e ácido dipicolínico (DPA) para detectar isolados produtores de metalo-β-lactamase (MβL). Ao total foram testados 150 isolados resistentes aos carbapenêmicos, molecularmente caracterizados quanto ao mecanismo de resistência. Foram incluídas diversas espécies entre Enterobacterales e bacilos gram-negativos não-fermentadores de glicose, sendo 71 isolados produtores de MβL (blaNDM, blaIMP-1, blaVIM, blaSPM, blaKPC + blaNDM, blaVIM + blaKPC), 61isolados produtores de serino-carbapenemases (blaKPC, blaGES-5, blaGES-16, blaOXA-23, blaOXA-48, blaOXA-58, blaOXA-143) e 18 isolados não produtores de carbapenemases. Os resultados se mostraram com 97% de sensibilidade e 94% de especificidade para DPA e 91% para EDTA na detecção das MβL, 96% de sensibilidade e especificidade de 96% para DPA e EDTA na detecção das KPC. Houve uma detecção de 100% de especificidade para não produtores de carbapenenmases. Não teve detecção para as serino-carbapenemases de classe D OXA-23, OXA-48, OXA-58, OXA-143. Além de haver uma interferência nos resultados com coprodução enzimática como VIM+KPC e NDM+KPC. Determinar a classe enzimática entre as carbapenemases na rotina laboratorial tem sido impreterível, especialmente pela recente aprovação pela ANVISA de um novo antimicrobiano ceftazidima-avibactam, o qual não apresenta atividade contra isolados produtores de MβL.

Phenotypic methods for detecting low-cost carbapenemases, which are easy to perform and quickly respond without a response time, are extremely fast in the routine of microbiology laboratories in the hospital area. In this work, the BLUE-CARBA colorimetric method with addition of enzyme inhibitors ethylenediaminetetraacetic acid disodium (EDTA) and dipicolinic acid (DPA) to detect metallo-β-lactamase (MβL) was evaluated. In total, 150 points resistant to carbapenems were tested, molecularly characterized as to the mechanism of resistance. There were several species among Enterobacterales and non-glucose fermenting gram-negative bacilli, being 71 concession produced from MβL (blaNDM, blaIMP-1, blaVIM, blaSPM, blaKPC + blaNDM, blaVIM + blaKPC), 61 isolates producing serine-carbapenemases (blaKPC, blaGES-5, blaGES-16, blaOXA-23, blaOXA-48, blaOXA-58, blaOXA-143) and 18 cover non-carbapenemase producers. The results differentiated with 97% sensitivity and 94% specificity for DPA and 91% for EDTA for detecting MβL, 96% for and 96% specific for DPA and EDTA for detecting KPC. There was a detection of 100% specificity for non-carbapenenmase producers. There was no detection for class D serine-carbapenemases OXA-23, OXA-48, OXA-58, OXA-143. There is also an interference in the results with enzymatic co-production such as VIM + KPC and NDM + KPC. Determining the enzyme class among carbapenemases in laboratory routine has been imperative, especially due to the recent approval by ANVISA of a new antimicrobial ceftazidime-avibactam, which has no activity against MβL winners.