Desenvolvimento de método de extração por ponteiras descartáveis (DPX) de cocaína e benzoilecgonina em amostra de cabelo

Abstract

As drogas de abuso estão diretamente relacionadas a crimes, apesar de as restrições e leis definidas ao seu uso. O uso da cocaína (COC), um alcaloide estimulante do sistema nervoso central, é um grande problema na sociedade brasileira. O número de usuários de COC cresce gradativamente, o que demanda exames toxicológicos com aplicação forense. A toxicologia forense é a ciência responsável por averiguar se há ou não a presença de drogas lícitas ou ilícitas em amostras biológicas que possam ter contribuído para um ato criminoso. Para a análise toxicológica forense, muitas vezes, as amostras convencionais, como sangue e urina, não estão em condições viáveis de análise, o que leva a necessidade de utilização de amostras não convencionais, como o cabelo. Essa matriz apresenta uma longa janela de detecção, entretanto é uma amostra complexa, demanda um adequado procedimento de preparo de amostra. O método de extração deve ser eficiente, prático, rápido, barato e produzir o menor volume possível de resíduos químicos. A extração em ponteiras descartáveis (DPX) promete cumprir todos esses requisitos, sendo um método de extração em fase sólida que utiliza uma ponteira contendo a fase sortiva entre dois filtros. Diante do exposto, o objetivo deste trabalho foi desenvolver um método de extração por DPX dos analitos COC e benzoilecgonina (BE) em amostra de cabelo e análise por cromatografia líquida de alta eficiência com detector de arranjo de diodo (CLAE-DAD). A metodologia consistiu primeiramente na coleta das amostras preferencialmente a partir da região do vértice posterior da cabeça, o mais próximo possível do couro cabeludo. Na próxima etapa, as amostras passaram pelos procedimentos de lavagem, fragmentação e digestão. Em seguida, foram submetidas à extração com as ponteiras DPX onde foram avaliados: no condicionamento da fase sortiva, o pH; na aplicação da amostra, novamente o pH e o tempo de equilíbrio; na lavagem, diferentes sequências de solventes; e na eluição o tempo de equilíbrio e a solução eluente. O produto da extração foi analisado por cromatografia empregando CLAE-DAD. Após a avaliação de cada parâmetro de forma univariada, as porcentagens de recuperação dos analitos foram aproximadamente 83% de COC e 79% de BE. Foi desenvolvido um método de preparo da amostra de cabelo para análise de COC e BE eficiente, prático, rápido, barato, com produção de menor volume de resíduos químicos, em comparação com a Extração em Fase Sólida (EFS) e com uma porcentagem satisfatória de recuperação, possibilitando, após a validação, a aplicação na área forense.

Drugs of abuse are directly related to crimes despite restrictions on use and defined laws. The use of cocaine (COC), an alkaloid stimulant of the central nervous system, is a major problem in Brazilian society. The number of COC users grows gradually, demanding toxicological tests with forensic application. Forensic toxicology is the science responsible for ascertaining whether or not legal or illegal drugs exist in biological samples that may have contributed to a criminal act. For forensic toxicological analysis, conventional samples, such as blood and urine, are not often in viable conditions for analysis, which leads to the need to use unconventional samples, such as hair. This matrix has a long detection window. However, as it is a complex sample, it demands an adequate sample preparation procedure. The extraction method must be efficient, practical, fast, cheap, and produce the smallest possible volume of chemical residues. Disposable tip extraction (DPX) promises to fulfill all these requirements, being a solid-phase extraction method that uses a tip containing the sorptive phase between two filters. Given the above, the objective of this work was to develop a method of DPX extraction of COC and benzoylecgonine (BE) analytes in hair samples and analysis by high-performance liquid chromatography with diode array detector (HPLC-DAD). The methodology consisted primarily of collecting samples preferably, from the posterior region of the head, as close as possible to the scalp. In the next step, the samples went through the washing, fragmentation, and digestion procedures. Then, they were subjected to extraction with DPX tips where they were evaluated: in the conditioning of the sorption phase, the pH; in the application of the sample, the pH and the equilibrium time; in the washing, a different sequence of solvents; and in the elution the equilibrium time and the eluent solution. The extraction product was analyzed by chromatography using HPLC-DAD. After univariate evaluation of each parameter, the percentages of analyte recovery were approximately 83% COC and 79% BE. Therefore an efficient, practical, fast, inexpensive method of preparing the hair sample for COC and BE analysis was developed, with the production of a smaller volume of chemical residues, compared to Solid Phase Extractions (SPE), and with a satisfactory percentage of recovery, allowing, after validation, the application in the forensic area.