Uso de PCR-RFLP no gene da Tireoglobulina em bovinos da raça Crioula Lageana

Abstract

Este trabalho foi conduzido com o intuito de identificar polimorfismos no gene da Tireoglobulina (TG), relacionado com a marmorização da gordura em bovinos da Raça Crioula Lageana, utilizando-se PCR-RFLP. O DNA genômico foi previamente extraído de amostras de folículos pilosos coletadas de 60 animais distribuídos na região de Lages-SC. Para isolar e amplificar a região correspondente ao éxon V do gene TG foram utilizados os iniciadores TGFWD 5’ TCCCAGAGTTAGCCTCCAAG 3’ e TGREV 5’ TGAATGAGAGGTGGTGAGGTC 3’. Os amplicons obtidos de aproximadamente 700pb foram submetidos à digestão utilizando-se a endonuclease Hinf-I. Os resultados obtidos após a RFLP mostraram a existência de polimorfismo na região estudada, caracterizado por três padrões diferentes de migração de bandas observáveis em 57 amostras e correspondentes aos genótipos MM, Mm e mm. Pela contagem direta destes padrões polimórficos, as frequências genotípicas foram iguais a 0,561, 0,334 e 0,105 para MM, Mm e mm, respectivamente e as frequências alélicas foram iguais a 0,728 e 0,212, respectivamente. A aderência ao equilíbrio de Hardy-Weinberg foi avaliada com teste de Qui-quadrado ao nível de 5% de significância, indicando que as frequências obtidas não estão em equilíbrio. Isto pode ser atribuído à existência de seleção natural / artificial nos animais avaliados. Os resultados obtidos neste estudo permitem inferir que foi possível identificar a existência de polimorfismos genéticos para o éxon V do gene TG em animais da raça Crioula Lageana utilizando-se a técnica de PCR-RFLP com a enzima Hinf-I.