Efeito do canabidiol sobre a expressão e a reconsolidação da memória aversiva contextual em ratas: potencial mecanismo de ação no hipocampo

Abstract

O canabidiol (CBD), principal constituinte não psicotomimético da Cannabis sativa, apresenta propriedades ansiolíticas e é capaz de prejudicar a reconsolidação da memória aversiva contextual em ratos. Os mecanismos de ação e as regiões encefálicas envolvidas nesses efeitos do CBD estão sendo elucidados. O CBD age por meio de diversos alvos farmacológicos, tais como os receptores canabinoides CB1, CB2 e os serotoninérgicos 5-HT1A. O antagonismo de receptores CB1 preveniu os efeitos do CBD sobre a reconsolidação da memória. Já o antagonismo de receptores 5-HT1A preveniu os efeitos anti-aversivos/ansiolíticos do CBD. O antagonismo dos receptores CB2 prejudicou a consolidação da memória. O hipocampo dorsal (HPCd) é uma região-chave na expressão e reconsolidação de memórias aversivas contextuais, embora poucos estudos investigaram tais aspectos em fêmeas. O objetivo deste estudo foi investigar os efeitos do CBD sobre a expressão e a reconsolidação da memória aversiva contextual em ratas e os possíveis mecanismos de ação envolvidos. A hipótese de trabalho é que o CBD recruta receptores diferentes do HPCd para produzir seus efeitos sobre a ansiedade e a memória. Ratas Wistar adultas foram submetidas ao condicionamento aversivo contextual (CAC) e, no dia seguinte, foram tratadas com CBD (1, 3 ou 10 mg/kg, i.p.) ou veículo (VEH) antes da sessão de reexposição por 5 min ao contexto pareado. Houve redução significativa do comportamento de congelamento nos grupos tratados com 3 ou 10 mg/kg de CBD em relação ao grupo controle. Esse efeito foi prevenido em fêmeas pré-tratadas intra-HPCd com WAY100635 (0,0001 µg/0,5µL; antagonista 5-HT1A), mas não com AM251 (0,0002 µg/0,5µL; agonista/antagonista inverso CB1) ou AM630 (0,001 µg/0,5µL; antagonista CB2), o que sugere que o CBD produz efeito ansiolítico/anti-aversivo através da ativação dos receptores 5-HT1A hipocampais. Posteriormente, avaliamos o efeito do CBD nas doses de 1, 3 e 10 mg/kg i.p. administradas previamente à exposição no teste do labirinto em cruz elevado (LCE). Neste teste, nenhum efeito do CBD foi observado, independentemente da dose testada. A seguir, investigamos os efeitos do CBD sobre a reconsolidação da memória em ratas. Utilizamos novamente o CAC, mas neste caso, ratas Wistar adultas foram reexpostas ao contexto pareado por 2 min e imediatamente após receberam CBD i.p. (10 mg/kg) ou intra-HPCd (30 nmol/0,5µL por hemisfério). No dia seguinte e 7 dias mais tarde, elas foram avaliadas no contexto pareado e, posteriormente, submetidas à sessão de reinstalação. Os dados obtidos sugerem que a administração sistêmica ou local de CBD prejudicou a reconsolidação da memória aversiva de forma duradoura. Tal efeito (sistêmico) foi prevenido em animais tratados intra-HPCd com AM251, mas não AM630. Em conjunto, nossos resultados indicam um recrutamento diferencial de receptores 5-HT1A e CB1 do HPCd nos efeitos do CBD sobre a ansiedade e memória em ratas.

Abstract: Cannabidiol (CBD), the main non-psychotomimetic constituent of Cannabis sativa, has anxiolytic properties and is capable of impair reconsolidation of contextual aversive memory. The mechanisms of action and brain regions involved in these effects of CBD are being elucidated. CBD acts through several pharmacological targets, such as CB1, CB2 cannabinoid receptors and 5-HT1A serotonergic receptors. The antagonism of CB1 receptors prevented the effects of CBD on memory reconsolidation. Antagonism of 5-HT1A receptors prevented the anti-aversive/anxiolytic effects of CBD. Antagonism of CB2 receptors impaired memory consolidation. The dorsal hippocampus (dHPC) is a key region in the expression and reconsolidation of contextual aversive memories, although few studies have investigated such aspects in females. The aim of this study was to investigate the effects of CBD on the expression and reconsolidation of contextual aversive memory in rats and the possible mechanisms of action involved. The working hypothesis is that CBD recruit?s different receptors than dHPC to produce its effects on anxiety and memory. Adult Wistar rats were subjected to contextual aversive conditioning (CAC) and the following day treated with CBD (1, 3 or 10 mg/kg, systemic) or vehicle (VEH) before re-exposure session for 5 min to the paired context. There was a significant reduction in freezing behavior in the groups treated with 3 or 10 mg/kg of CBD compared to the control group. This effect was prevented in females pretreated intra-HPCd with WAY100635 (0.0001 µg/0.5µL; 5-HT1A antagonist), but not AM251 (0.0002 µg/0.5µL; CB1 inverse agonist/antagonist) or AM630 (0.001 µg/0.5 µL; CB2 antagonist), which suggests that CBD produces an anxiolytic/anti-aversive effect through hippocampal 5-HT1A receptors. Subsequently, we evaluated the effect of CBD at doses of 1, 3 and 10 mg/kg systemic administered prior to exposure in the elevated plus maze (LCE) test. In this test, the effects of CBD were not observed in any of the doses tested, suggesting that, in this test, there was no change in the behavioral parameters. Next, we investigated the effects of CBD on memory reconsolidation in rats. We used CAC again, but in this case adult Wistar rats were re-exposed to the paired context for 2 min and immediately afterwards received CBD systemic (10 mg/kg) or intra-HPCd (30 nmol/0.5µL per hemisphere). On the following day and 7 days later, they were evaluated in the paired context and subsequently submitted to a reinstallation session. The data obtained suggest that the systemic or local administration of CBD impaired the reconsolidation of aversive memory in a lasting way. Such a (systemic) effect was prevented in animals treated intra-HPCd with AM251, but not AM630. Together, our results indicate a differential recruitment of HPCd 5-HT1A and CB1 receptors in the effects of CBD on anxiety and memory in female rats.