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Abstract:
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Os Siglecs (sialic-acid-binding immunoglobulin-like lectins) são receptores, em sua grande maioria inibitórios, expressos em células do sistema imune que através da sua ligação com glicoconjugados sialilados alteram as respostas celulares. A neuraminidase é uma sialidase que cliva o ácido siálico de seus glicoconjugados, interrompendo as vias inibitórias intracelulares. A resposta exacerbada e desregulada de leucócitos na sepse está diretamente relacionada à consequências deletérias como lesão e disfunção tecidual. Nossa hipótese é de que os inibidores de neuraminidases virais, oseltamivir e zanamivir, inibem também a atividade da neuraminidase do hospedeiro, mantendo, assim, a interação Siglec-ácido siálico e as vias inibitórias em leucócitos. Para isso, primeiramente, caracterizamos a expressão basal de receptores Siglecs na superfície de monócitos humanos em amostras de sangue total. Observamos que os receptores Siglecs-3 e -9 possuem maior densidade entre os Siglecs expressos (-3, -5, -7 e -9) na membrana dessas células. A expressão de Siglecs em amostras de sangue total também foi avaliada em resposta à diferentes concentrações de LPS (0,01 μg/mL, 0,1 μg/mL e 1 μg/mL). A densidade de Siglec-3, Siglec-5 e Siglec-7 aumentou de maneira diretamente proporcional ao aumento da concentração de LPS, enquanto a expressão de Siglec-9 apresentou um perfil invertido. Os resultados do ensaio de tempo-resposta (0.5, 1.5 e 3 h) demonstraram um aumento crescente na expressão dos receptores ao longo do tempo. A avaliação da glicosilação após estímulo com LPS demonstrou uma diminuição dos ácidos siálicos na conformação α2-3, a qual foi inibida pelo tratamento com oseltamivir ou zanamivir, sugerindo que esses fármacos inibem as neuraminidases do hospedeiro. Portanto, nossos resultados demonstram a capacidade que esses fármacos possuem de alterarem o status de sialilação da célula e , por conseguinte, atuarem como possíveis ferramentas farmacológicas para o tratamento de doenças que possuem um componente inflamatório importante, como, por exemplo, a sepse. |
