Efeito antiagregante de extratos brutos etanólicos de Citrus sinensis, Litchi chinensis, Nephelium lappaceum e Platonia insignis

Abstract

A hemostasia é o mecanismo que busca o equilíbrio dinâmico entre os fatores pró-trombóticos e antitrombóticos e ela exerce três principais funções: manter o sangue em um estado fluido na corrente sanguínea, cessar o sangramento após uma lesão vascular e restaurar a integridade dos vasos. Distúrbios da hemostasia podem gerar trombose, um evento diretamente relacionado com doenças cardiovasculares, uma das principais causas de morbimortalidade em todo o mundo. Fármacos antitrombóticos são utilizados para tratar e prevenir esses eventos tromboembólicos, entretanto, estes fármacos ainda estão associados a efeitos adversos que limitam o seu uso universal e dificultam a adesão ao tratamento. Nesse contexto, os fármacos de origem natural surgem como uma possibilidade para contornar tal problemática. Estudos prévios realizados pelo nosso grupo de pesquisa demonstraram o potencial antiagregante de uma série de extratos brutos de plantas. Diante disso, este trabalho teve como objetivo avaliar os efeitos de compostos de origem natural, na forma de extratos brutos, sobre a agregação plaquetária e determinar as suas concentrações inibitórias de 50% (CI50). Para os ensaios de agregação plaquetária, as amostras de plasma rico em plaquetas foram incubadas a 37°C por 5 minutos com os extratos brutos em diferentes concentrações ou com DMSO 0,5% (controle) e, posteriormente, a agregação foi estimulada pela adição de difosfato de adenosina (ADP; 10 µM) ou epinefrina (5 μg/mL). Na triagem, o extrato etanólico de bacuri (fruta) (800 µg/mL) inibiu significativamente a agregação plaquetária, contudo, essa inibição foi inferior a 50% e, portanto, a CI50 não pode ser determinada. Para os compostos previamente avaliados pelo grupo de pesquisa, as CI50 do extrato etanólico de laranja (coleta: 22/11/2017) e do extrato etanólico de laranja (coleta: 16/12/2017) para a epinefrina foram de 654,0 ± 21,0 µg/mL e de 482,2 ± 24,6 µg/mL, respectivamente. As CI50 do extrato etanólico da semente de lichia para ADP e epinefrina foram, respectivamente, 211,8 ± 5,1 µg/mL e 128,8 ± 8,6 µg/mL, do extrato etanólico de bacuri (semente) 529,4 ± 172,2 µg/mL e 438,6 ± 7,1 µg/mL, e do extrato etanólico de rambutan (caule) 202,9 ± 7,9 µg/mL e 326,3 ± 11,9 µg/mL. A compilação dos resultados demonstrou que, com exceção do extrato etanólico de rambutan (caule), todos os extratos avaliados inibem mais fortemente a agregação induzida por epinefrina, e que o extrato etanólico da semente de lichia apresentou o melhor conjunto de CI50, portanto, considerado o extrato com melhor potencial antiagregante.

Hemostasis is the mechanism that seeks a dynamic balance between pro-thrombotic and antithrombotic factors, and has three main functions: it keeps the blood in a fluid state in the bloodstream, stops bleeding after vascular injury, and restores vessel integrity. Disturbances in hemostasis can lead to thrombosis, an event directly related to cardiovascular diseases, one of the leading causes of morbidity and mortality worldwide. Antithrombotic drugs are used to treat and prevent these thromboembolic events, however, these drugs are still associated with adverse effects that limit their universal use and hinder treatment adherence. In this context, drugs of natural origin emerge as a possibility to circumvent this problem. Previous studies performed by our research group have demonstrated the antiaggregant potential of a series of crude plant extracts. In view of this, this work aimed to evaluate the effects of compounds of natural origin, in the form of crude extracts, on platelet aggregation and to determine their 50% inhibitory concentrations (IC50). For the platelet aggregation assays, platelet-rich plasma samples were incubated at 37°C for 5 min with the crude extracts at different concentrations or with 0.5% DMSO (control) and, subsequently, aggregation was stimulated by the addition of adenosine diphosphate (ADP; 10 µM) or epinephrine (5 μg/mL). In screening, bacuri ethanol extract (fruit) (800 µg/mL) significantly inhibited platelet aggregation, however, this inhibition was less than 50% and therefore the IC50 cannot be determined. For the compounds previously evaluated by the research group, the IC50 of orange ethanol extract (collected: 11/22/2017) and orange ethanol extract (collected: 12/16/2017) for epinephrine were 654.0 ± 21.0 µg/mL and 482.2 ± 24.6 µg/mL, respectively. The IC50 of lychee seed ethanol extract for ADP and epinephrine were, respectively, 211.8 ± 5.1 µg/mL and 128.8 ± 8.6 µg/mL, of bacuri ethanol extract (seed) 529.4 ± 172.2 µg/mL and 438.6 ± 7.1 µg/mL, and of rambutan ethanolic extract (stem) 202.9 ± 7.9 µg/mL and 326.3 ± 11.9 µg/mL. The compilation of the results demonstrated that, with the exception of the rambutan ethanolic extract (stem), all evaluated extracts inhibit more strongly the aggregation induced by epinephrine, and that the lychee seed ethanol extract presented the best set of IC50 being, therefore, considered the extract with the best antiaggregant potential.