Avaliação da atividade antiamebiana de compostos sintéticos e semissintéticos contra formas de Acanthamoeba castellanii

Abstract

Nas últimas décadas, Acanthamoeba spp. emergiram como patógenos de importância clínica por ocasionarem infecções oportunistas e não oportunistas graves, como a encefalite amebiana granulomatosa (EAG) e ceratite amebiana (CA). Embora existam opções de tratamento, os fármacos são inespecíficos e pouco ativos frente as formas císticas de Acanthamoeba spp. Nesse contexto, o objetivo do presente trabalho foi avaliar a atividade amebicida de diferentes classes de compostos sintéticos e semissintéticos. Inicialmente, realizou-se a triagem de derivados isoxazolil-sulfonamidas, derivados triazólicos de O-metil-olivetol e compostos de coordenação frente a trofozoítos de Acanthamoeba castellanii (ATCC 50492). Para os compostos selecionados, foi realizada a avaliação da atividade amebicida frente a trofozoítos e cistos, avaliação da interação de fármacos frente a tofozoítos, e citotoxidade dos compostos utilizando linhagem celular de córnea de coelho (ATCC - CCL 60). Durante a triagem, observou-se maior potencial amebicida para o derivado triazólico do O-metil-olivetol (Me2) que apresentou inibição da viabilidade de 31,5 ± 3,6% dos trofozoítos em 24 h. Os compostos de coordenação de ferro e cobre demostraram alto potencial amebicida, com inibição da viabilidade de trofozoítos acima de 80%. Os compostos de coordenação de cobre(II) selecionados (Cp12 e Cp13) apresentaram concentração amebicida inibitória mínima (CAIM) de 200 µM e valores de concentração inibitória média (CI50) inferiores a 10 µM. Frente aos cistos, o composto Cp12 apresentou redução na viabilidade de 47,6 ± 2,53% na concentração de 200 µM em 48 h de incubação. O ensaio de interação de fármacos demostrou um efeito sinérgico para o composto Cp12 com a clorexidina, reduzindo as concentrações de CAIM de ambos os fármacos. No ensaio de citotoxicidade foi possível observar que os compostos selecionados possuem um efeito dose-dependente frente as células de córnea de coelho. Os resultados obtidos demostram que os compostos de coordenação utilizados são promissores e inéditos para ação anti-Acanthamoeba e apresentam ação frente a trofozoítos e cistos, como também ação sinérgica com a clorexidina em baixas concentrações de de ambos os compostos. Os compostos de coodenação selecionados são promissores para o tratamento e prevenção de infecções causadas por Acanthamoeba spp.

Abstract: In recent decades, Acanthamoeba spp. emerged as clinically important pathogens for causing severe opportunistic and non-opportunistic infections, such as granulomatous amoebic encephalitis (EAG) and amoebic keratitis (AC). Although there are treatment options, the drugs are nonspecific and not very active against the cystic forms of Acanthamoeba spp. In this context, the present work aimed to evaluate the amebicidal activity of different classes of synthetic and semi-synthetic compounds. Initially, the screening of isoxazolyl-sulfonamide derivatives, triazole derivatives of o-methyl-olivetol, and coordination compounds against Acanthamoeba castellanii trophozoites (ATCC 50492) was carried out. For the selected compounds, the evaluation of the amebicidal activity against trophozoites and cysts, evaluation of the interaction of drugs against trophozoites, and cytotoxicity of the compounds using rabbit corneal cell line (ATCC - CCL 60) were carried out. During the screening, there was a greater amebicidal potential for the triazole derivative of O-methyl-olivetol (Me2), which showed inhibition of viability of 31.5 ± 3.6% of trophozoites in 24 h. The coordination compounds of iron and copper showed high amebicidal potential, with inhibition of trophozoite viability above 80%. The selected copper(II) coordination compounds (Cp12 and Cp13) had a minimum inhibitory concentration (CAIM) of 200 µM and mean inhibitory concentration (IC50) values below 10 µM. Against the cysts, the compound Cp12 showed a reduction in viability of 47.6 ± 2.53% at a concentration of 200 µM in 48 h of incubation. The drug interaction assay demonstrated a synergistic effect for the compound Cp12 with chlorhexidine, reducing the CAIM concentrations of both drugs. In the cytotoxicity assay, it was possible to observe that the selected compounds have a dose-dependent effect against rabbit corneal cells. The results obtained demonstrate that the coordination compounds used are promising and novel for anti-Acanthamoeba action and show action against trophozoites and cysts and synergistic action with chlorhexidine at low concentrations of both compounds. The selected coordinating compounds hold promise for the treatment and prevention of infections caused by Acanthamoeba spp.