Avaliação de modificações no teste colorimétrico Poli-NP para triagem da resistência às polimixinas em isolados de Enterobacterales

Abstract

O aumento da resistência antimicrobiana em bacilos gram-negativos é um motivo de preocupação na saúde mundial, devido a escassez de opções terapêuticas. As polimixinas são utilizadas na prática clínica como último recurso no tratamento dessas bactérias multirresistentes, porém já são relatadas altas taxas de mortalidade por bactérias gram-negativas resistentes às polimixinas, tornando um desafio para os profissionais da saúde, tanto na conduta terapêutica quanto na detecção dessas resistências. Testar a sensibilidade de bactérias às polimixinas é extremamente díficil, pois métodos comuns como o teste epsilométrico (Etest) e disco-difusão não são confiáveis, e a microdiluição em caldo, que é o método de referência, é trabalhosa e pouco viável para a maioria dos laboratórios clínicos. A proposta deste estudo é avaliar modificações em um método colorimétrico de triagem para detecção de resistência às polimixinas em Enterobacterales, e comparar com os resultados do método de referência. O Teste Rápido de Polimixina NP (Nordmann-Poirel) foi realizado conforme protocolo original e modificado, incorporando as polimixinas por eluição dos discos. Foram testados 147 isolados clínicos de Enterobacterales. A maioria dos isolados foram Klebsiella pneumoniae (51%), seguida por Enterobacter cloacae (21%) e Escherichia coli (15%). Os resultados demonstraram um total de 97 isolados sensíveis e 50 resistentes, pela microdiluição em caldo. Em comparação com os resultados obtidos pela microdiuluição em caldo, o método Poli-NP original obteve valor de Kappa de 0,76 e intervalo de confiança de 95% de 0,649 a 0,874 para a polimixina B. Para os métodos Poli-NP modificados os valores obtidos de Kappa foram de 0,72 e 0,70, enquanto os intervalos de confiança de 95% foram 0,609 a 0,844 e 0,586 a 0,829 para colistina e polimixina B, respectivamente. Esses resultados sugerem que o método pode ser utilizado para identificar rapidamente portadores de isolados resistentes à polimixina, sendo um método de triagem útil na rotina clínica laboratorial, principalmente em ambientes com recursos limitados.

The increase in antimicrobial resistance in gram-negative bacilli is a matter of concern in world health, due to the scarcity of therapeutic options. Polymyxins are used in clinical practice as a last resort in the treatment of these multiresistant bacteria, but high mortality rates due to polymyxin-resistant gram-negative bacteria have already been reported, making it a challenge for health professionals, both in the therapeutic approach and in the detection of these bacteria. resistances. Testing the sensitivity of bacteria to polymyxins is extremely difficult, as common methods such as the epsilometric test (Etest) and disc diffusion are unreliable, and microdilution in broth, which is the reference method, is laborious and not feasible for most of clinical laboratories. The purpose of this study is to evaluate changes in a colorimetric screening method for detecting resistance to polymyxins in Enterobacterales, and compare it with the results of the reference method. The Polymyxin NP Rapid Test (Nordmann-Poirel) was performed according to the original and modified protocol, incorporating the polymyxins by elution from the disks. 147 clinical isolates of Enterobacterales were tested. Most isolates were Klebsiella pneumoniae (51%) followed by Enterobacter cloacae (21%) and Escherichia coli (15%). The results showed a total of 97 sensitive and 50 resistant isolates, by broth microdilution. In comparison with the results obtained by broth microdilution, the original Poly-NP method obtained a Kappa value of 0.76 and a 95% confidence interval of 0.649 to 0.874 for polymyxin B. For the modified Poly-NP methods, the values Kappa values were 0.72 and 0.70, while the 95% confidence intervals were 0.609 to 0.844 and 0.586 to 0.829 for colistin and polymyxin B, respectively. These results suggest that the method can be used to quickly identify carriers of polymyxin-resistant isolates, being a useful screening method in clinical laboratory routine, especially in environments with limited resources.