Caracterização dos efeitos comportamentais e microgliais da administração de LPS no camundongo YAC128 da doença de Huntington

Abstract

A doença de Huntington (DH) é uma doença neurodegenerativa rara de caráter hereditário, conhecida principalmente por seus sintomas motores e que ocorre por mutação da proteína Huntingtina (Htt). Na DH, anterior aos sintomas motores podem surgir sintomas cognitivos e psiquiátricos, tais como a depressão. A região encefálica mais afetada durante a progressão da doença é o estriado, mas também são vistas alterações em outras regiões como o hipocampo, região que se relaciona com os sintomas psiquiátricos presentes na doença. É visto que, também anterior ao surgimento dos sintomas motores, ocorre o aumento do número das células da microglia em sua forma ativada. A microglia é conhecida como o macrófago do Sistema nervoso central (SNC), e possui, entre outras diversas funções, a função de responder a estímulos que possam vir a ser danosos ao SNC. Neste trabalho propôsse utilizar da neuroinflamação induzida por Lipopolissacarídeo (LPS) para avaliar as possíveis alterações dependente da presença ou não da mutação da Htt, e também alterações em marcadores microgliais. Para tanto, camundongos YAC128 e WT machos e fêmeas com 3 meses de idade receberam uma injeção aguda de LPS (0,5 mg/kg), e 24h após a injeção tiveram o comportamento analisado e material cerebral coletado para análises histológicas. Foi observado que o LPS, independente de genótipo, foi capaz de gerar um comportamento do tipo-ansioso nos camundongos, reduzindo o número de entradas dos animais no centro do campo aberto e também a distância percorrida. Além de ter induzido também um comportamento do tipodepressivo, aumentando o tempo de imobilidade dos animais no teste do nado forçado. Também foi visto o aumento do marcador CD68 nos animais YAC128 que receberam LPS. Para o marcador TMEM119 encontramos uma diferença de genótipo de forma que os animais YAC128 que receberam salina apresentam mais marcação do que os animais WT que também receberam salina. Nossos resultados apontam para uma real alteração de marcadores microgliais no hipocampo dos animais, com ou sem estímulo inflamatório gerado por LPS, e também reforçam os possíveis efeitos da inflamação no comportamento ansioso e depressivo dos animais.

Abstract: Huntington's disease (HD) is a rare hereditary neurodegenerative disease, known mainly for its motor symptoms and which occurs by mutation of the Huntingtin protein (Htt). In HD, cognitive and psychiatric symptoms such as depression may appear prior to motor symptoms. The brain region most affected during disease progression is the striatum, but changes are also seen in other regions such as the hippocampus, a region that is related to the psychiatric symptoms present in the disease. It is seen that, also prior to the onset of motor symptoms, there is an increase in the number of microglia cells in their activated form. Microglia is known as the macrophage of the central nervous system (CNS), and has, among other functions, the function of responding to stimuli that may be harmful to the CNS. In this work, it was proposed to use Lipopolysaccharide (LPS)-induced neuroinflammation to evaluate possible changes depending on the presence or absence of the Htt mutation, as well as changes in microglial markers. For this, male and female YAC128 and WT mice at 3 months of age received an acute injection of LPS (0.5 mg/kg), and 24h after the injection had their behavior analyzed and brain material collected for histological analysis. It was observed that LPS, regardless of genotype, was able to generate an anxious-like behavior in mice, reducing the number of animals entering the center of the open field and also the distance traveled. In addition to having also induced a depressive-like behavior, increasing the immobility time of the animals in the forced swimming test. An increase in CD68 marker was also seen in YAC128 animals that received LPS. For the TMEM119 marker, we found a genotype difference so that the YAC128 animals that received saline showed more marking than the WT animals that also received saline. Our results point to a real change in microglial markers in the hippocampus of animals, with or without inflammatory stimulus generated by LPS, and also reinforce the possible effects of inflammation on the animals' anxious and depressive behavior.