Caracterização da ferroptose na ação antitumoral da lectina ConBr sobre células de glioma.

Abstract

Gliomas são tumores cerebrais primários originados de células gliais. O glioblastoma multiforme (GBM) é o mais agressivo, devido a sua capacidade infiltrativa e resistência aos tratamentos, sendo a sobrevida média dos pacientes de 15 meses. Assim, é fundamental o desenvolvimento de estratégias terapêuticas mais seletivas e eficientes. As alterações moleculares do GBM incluem modificação do padrão de glicosilação, que pode ser reconhecida por proteínas ligadoras de glicanos, as lectinas. Nós temos indicado que a lectina purificada das sementes de Canavalia brasiliensis (ConBr) pode desencadear uma sinalização antiglioma. Entre os mecanismos de resistência do GBM destaca-se o trocador cistina/glutamato (sistema Xc-), responsável pela captura de cistina para síntese de glutationa, um antioxidante que protege as células de morte celular por ferroptose. O sistema Xc- apresenta uma subunidade reguladora glicosilada (CD98) e outra transportadora (xCT). Estudos de bioinformática mostraram que ConBr pode se ligar aos glicanos de CD98 e alterar a subunidade xCT. Utilizando cultura celular de glioma (linhagens C6 e U87) expostas à ConBr (30 μg/mL; 24h) e inibidores do sistema Xc-, avaliamos a ação de ConBr sobre esse sistema e a possível indução de ferroptose. Os principais resultados evidenciaram: (1) ConBr não induz queda de viabilidade das células U87, entretanto esta linhagem foi muito sensível ao inibidor do sistema Xc-, sulfassalazina (SSZ); (2) ConBr prejudicou a ação de SSZ sobre as células U87. Na linhagem de glioma C6, ConBr (30 μg/mL; 24 h) causa redução (~40%) da viabilidade celular, medida pelo método do MTT. A combinação de ConBr com o inibidor de Xc-, erastina, não intensificou a queda de viabilidade das células C6, mas pareceu prejudicar a ação citotóxica de erastina, sugerindo que ConBr pode alterar a interação de erastina com o sistema Xc-. Em conjunto os dados indicam a linhagem C6 como melhor modelo para nosso estudo e sugerem que ConBr pode interagir com o sistema Xc-, como previamente indicado pelo estudo de bioinformática. Entretanto, serão necessários ensaios adicionais, para caracterizar a modulação do sistema Xc-, produção de espécies reativas (ROS) e ferroptose, bem como o papel da autofagia na ação antiglioma de ConBr.