Abstract:
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Porophyllum ruderale Jacq. Cass (Asteraceae) é considerada uma planta medicinal e alimentícia não convencional (PANC) comumente encontrada no sul do Brasil. Seu uso popular é descrito principalmente destinado ao tratamento de traumatismos e contusões, tendo um perfil químico interessante e complexo, com ações antiinflamatórias e cicatrizantes já descritas na literatura. Somado a isto, recentes publicações descrevem a notável simbiose entre plantas medicinais e seus fungos endofíticos, sendo estes os fungos que habitam no interior dos tecidos vegetais e vivem em relação harmônica com a planta hospedeira. Estes microrganismos são amplamente descritos como potenciais fontes de metabólitos. Neste contexto, 25 fungos endofíticos foram isolados das folhas de P. ruderale e destes, foi selecionada a espécie Penicillium sp. para o estudo. O material fúngico foi cultivado em meio de cultura agar batata dextrose (BDA), a 28º C por 7 e 14 dias, sua identificação se deu através do microcultivo e sequenciamento de DNA (ITS). A produção do extrato bruto foi realizada através da maceração em acetato de etila, e, visando uma semi-purificação do extrato em grupos de coeficientes de partição semelhantes, este foi submetido a uma partição líquido-líquido com solventes em ordem crescente de polaridade: hexano, clorofórmio e acetato de etila, respectivamente. Após, as frações foram secas em rotaevaporador e cada extrato/fração foi avaliado por técnicas cromatográficas. Os resultados obtidos revelaram um rendimento do extrato bruto de 0,185%. Com o particionamento líquido-líquido, foi possível obter um rendimento de 1,906% para a fração de acetato de etila, 8,386% para a fração de diclorometano, 61,757% para a fração de hexano e 9,329% para o resíduo aquoso. O perfil químico avaliado por Cromatografia em camada delgada (CCD) e Cromatografia líquida de ultra eficiência acoplada a espectrômetro de massas (CLUE-ESI-Qtof-EM), que revelou a presença de uma molécula com íon molecular condizente a citrinina (m/z 251.09 [M+H]⁺, peso molecular de 250,0841235 g/mol), previamente identificada em fungos do gênero Penicillium e Aspergillus. Foi observado pico intenso condizente com o íon molecular desta substância na fração de diclorometano e com poucas impurezas. Ainda foi realizada a análise do extrato bruto por método de aquisição dependente de dados (DDA), que, através dos programas MSDIAL e MS-FINDER, foi possível anotar a presença de duas outras substâncias, a dihidrocitrinina e a dihidrocitrinona, ambas são metabólitos secundários encontrados em fungos do gênero Penicillium já relatados na literatura e derivados da citrinina. |