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Abstract:
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A Passiflora setacea cv. BRS Pérola do Cerrado é um cultivar da espécie nativa, Passiflora setacea, desenvolvida pela Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuária (EMBRAPA, Cerrado) através de melhoramento genético. É popularmente conhecida como “maracujá do sono”, devido às suas propriedades sedativas, e é a primeira passiflora silvestre registrada e protegida pelo Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento (MAPA). Este estudo teve por objetivo avaliar o efeito do tempo de cultivo no crescimento e nos perfis fitoquímicos dos calos de cotilédones cultivados in vitro por diferentes períodos de tempo. Os perfis fitoquímicos dos calos também foram comparados com os perfis fitoquímicos de extratos de folhas, cascas e sementes para avaliar o potencial dos calos na produção in vitro de compostos de interesse. Os calos de cotilédones foram mantidos em meio de cultura Murashige & Skoog (MS) suplementado com 88,5 mM de sacarose, 2,5 μM de 2,4-D e 0,2% Phytagel. Ao final de 30, 60 e 90 dias de cultivo os calos foram coletados para as avaliações do crescimento e para as análises fitoquímicas, todos os materiais vegetais foram secos ao ar livre sob temperatura média de 23 ± 2°C e 70% de umidade relativa, até a estabilização da massa seca. As análises fitoquímicas foram realizadas através de cromatografia líquida de ultra eficiência com ionização por eletrospray acoplada à espectrometria de massas (CLUE-ESI-EM). Os dados técnicos gerados foram avaliados por meio de métodos estatísticos, tais como análise de componentes principais (PCA), k-means e importância variável na projeção (VIP), com base na análise discriminante de mínimos quadrados parciais (PLS-DA). Os resultados da pesquisa indicaram que o tempo de cultivo influenciou significativamente o crescimento dos calos, bem como a produção de metabólitos. Ácidos orgânicos de interesse e com atividade biológica foram produzidos pelos calos como os ácidos cítrico, glucurônico, treônico e ribônico, sendo esses últimos envolvidos, respectivamente, no mecanismo antioxidante das plantas e indicado como potencial inibidor da acetilcolinesterase, para possível tratamento da Alzheimer. Ácidos orgânicos, flavonoides bioativos, como o isoschaftosídeo, O-metil-epicatequina, sabian, terpenos bioativos, como o astragalosídeo II e cicloartano glicosídeos, lipídios, em especial o sulfoquinovosil monoacilglicerol ( SQMG), com várias atividades biológicas foram também detectados em extratos de folhas e sementes. Análises dos metabólitos via Importância das Variáveis na Projeção (Variables of Importance in the Projection -VIP) revelou o alto potencial das culturas in vitro de cotilédones como fontes de metabólitos relevantes, com atividade biológica como ácido cítrico (VIP score 1,4) e o flavonoide sabian (VIP > 1,8), além do N-frutosil piroglutamato (VIP > 1,4), ácido azelaico (VIP > 1,2) e ácido treônico (VIP > 1,0). A similaridade observada entre os perfis fitoquímicos das folhas e cascas com os calos sugere a viabilidade de otimização do cultivo in vitro para a produção de metabólitos. Este estudo contribuiu para o aperfeiçoamento de protocolos de cultivo in vitro de culturas de calos de cotilédone de P. setácea BRS-PC, demonstrando que o tempo de cultivo de 30 dias foi o mais efetivo em incrementar o crescimento e produção de uma maior diversidade de metabólitos em um tempo de cultivo mais curto. |
