Estudo da imunofenotipagem por citometria de fluxo como ferramenta auxiliar no diagnóstico do câncer de cavidade oral e de orofaringe, comparada aos dados clínicos, histológicos e imunohistoquímicos

Abstract

Introdução: o estudo de biomarcadores para o câncer vem crescendo e a imunofenotipagem por citometria de fluxo (CF) representa um método rápido, sensível e específico de avaliação desses marcadores. Objetivos: avaliar a correlação das variáveis clínicas com a expressão dos biomarcadores Ki-67, p53 e p16 em amostras de carcinoma epidermóide de cavidade oral e orofaringe, pelos métodos de imuno-histoquímica (IHQ) e imunofenotipagem por citometria de fluxo. Metodologia: foi realizado um estudo do tipo observacional analítico transversal e quantitativo. Foram incluídos na amostra, pacientes que apresentaram lesões bucais com suspeita clínica de Carcinoma Epidermóide de orofaringe, hipofaringe e laringe. As amostras foram obtidas a partir da biopsia ou peça cirúrgica de um mesmo paciente e submetidas as seguintes análises: exame histológico complementado por imunoistoquiímica (padrão ouro) e exame de imunofenotipagem por CF. Foram avaliadas a expressão dos marcadores Ki-67, p16 e p53. Os dados extraídos dos exames laboratoriais foram correlacionados com as informações clínicas obtidas por meio dos prontuários médicos. Resultados: dos 50 pacientes da amostra, 42 tiveram diagnóstico histológico confirmatório de Carcinoma Epidermóide. Houve predominância de pacientes do sexo masculino, com média de idade de 62 anos e usuários de tabaco, sendo que 56% dos pacientes usavam concomitante tabaco e álcool. Na correlação entre as variáveis clínicas e a expressão dos marcadores, houve associação estatisticamente significativa entre tamanho do tumor e a expressão de Ki-67 e p53 por imunofenotipagem por citometria de fluxo. Os testes de associação entre os biomarcadores observados nos dois exames demostraram equivalência, porém com fraca concordância pelo teste Kappa. Conclusões: o perfil clínico da amostra foi compatível com os dados publicados para o câncer de boca. A associação entre as características clínicas da doença com as observações dos exames de histopatologia, IHQ e imunofenotipagem por CF foram, na maioria, estatisticamente não significativas. Provavelmente, esse fato está relacionado ao viés de poucas amostras analisadas, principalmente por falta de viabilidade celular. O estudo de tumores de origem epitelial por CF ainda é pioneiro e novos trabalhos são necessários a fim de aprimorar essa metodologia.

Abstract: Introduction: the study of cancer biomarkers is increasing and immunophenotyping by flow cytometry (FC) represents a fast, sensitive, and specific method for evaluating these markers. Aims: to evaluate the correlation of clinical variables with the expression of Ki-67, p53 and p16 biomarkers in samples of squamous cell carcinoma of the oral cavity and oropharynx, by immunohistochemistry (IHC) and immunophenotyping by flow cytometry methods. Methods: this study is observational analytical cross-sectional and quantitative. Patients with oral, oropharyngeal, hypopharyngeal and laryngeal lesions with clinical suspicion of squamous cell carcinoma were included in the sample. Samples obtained from biopsy or surgery of the primary tumor were sent for this analyses: histopathological examination and IHC (gold standard) and immunophenotyping by FC. The expression of Ki-67, p16 and p53 markers were evaluated. Data extracted from laboratory tests were correlated with clinical information obtained from medical records. Results: 50 patients were evaluated, but only 42 had a histopathological diagnosis of oral squamous cell carcinoma. There was a predominance of males, a mean age of 62 years old, and abuse of tobacco, with 56% of patients in concomitant use of tobacco and alcohol. In the correlation between clinical variables and marker expression, there was a statistically significant association between tumor size and Ki-67 and p53 expression by immunophenotyping by FC. The tests of association between the biomarkers observed in the IHC and FC were equivalent, but with poor reliability by the Kappa test. Conclusions: the sample's clinical profile was consistent with published data for oral cancer. The association between the clinical characteristics of the disease and the histopathology, IHC, and immunophenotyping by FC exams were, in almost all cases, not statistically significant. This fact is probably associated to the bias of the few samples analyzed, mainly due to the abscence of cell viability. The study of epithelial tumors by FC is still pioneering and further studies are required to improve this methodology.