Abstract:
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Rhodnius prolixus é um inseto hematófago da ordem Hemíptera, família Reduviidae e subfamília Triatominae, alimenta-se diretamente de arteríolas e vênulas. Ele possui um aparelho bucal especializado, formando um canal alimentar e um canal salivar. Durante a alimentação, sua saliva é liberada continuamente. No momento da hematofagia em um mamífero infectado, o Trypanosoma rangeli é ingerido, iniciando assim a interação parasito-hospedeiro. R. prolixus, também conhecido como barbeiro, é um dos principais vetores de Trypanosoma rangeli e Trypanosoma cruzi na América Latina, sendo este último o agente etiológico da Doença de Chagas. Chagas é uma doença endêmica em 21 países, incluindo América do Sul, Central e parte da América do Norte, com cerca de 90 milhões de pessoas expostas ao T. cruzi e seis milhões estimadas como infectadas. A principal forma de transmissão é vetorial, e o controle das populações de insetos vetores é o método mais eficaz de prevenção. Embora o T. rangeli não seja patogênico para mamíferos, sua coinfecção com T. cruzi e a reatividade cruzada em testes sorológicos, acabam por inteferir nos diagnósticos da doença de Chagas. Buscando entender melhor a interação parasito-vetor durante a infecção, este trabalho busca identificar transcritos diferencialmente expressos em hemolinfa e glândula salivar de R. prolixus infectado por T. rangeli e avaliar mudanças na expressão gênica entre tecidos saudáveis e infectados. O RNA foi extraído e sequenciado, e o transcriptoma de T. rangeli e R. prolixus foi montado. Entre os 13.436 transcritos de T. rangeli, 4.336 foram novas isoformas, das quais 459 não possuem sequência truncada. Desses, 261 transcritos foram anotados como hipotéticos e 198 tiveram anotação funcional. Isoformas de grandes famílias multigênicas como MASP, GP63, Trans-sialidases, DGF e RHS foram identificadas, com uma isoforma de GP63 (logFC = 1,91) e três de Trans-sialidases (logFC = 1,98; logFC = 1,88; logFC = 2,78) apresentando expressão diferencial. Alé disso, a análise de expressão diferencial foi realizada utilizando DESeq2, comparando tecidos saudáveis e infectados de R. prolixus. Foram considerados diferencialmente expressos transcritos com log2 fold change ≤ -2 ou ≥ 2 e valor de p-ajustado < 0,05. No tecido das glândulas salivares, foram identificados 12 genes que obtiveram mudanças nos seus níveis de expressão, enquanto 7 genes foram encontrados no tecido da hemolinfa. Esses genes estão associados a processos como sinalização, degradação de proteínas, regulação da expressão gênica e manutenção da integridade celular, sugerindo intensa resposta celular do hospedeiro ao estresse da infecção pelo parasita. Análises são necessárias para identificar outros genes envolvidos no processo de infecção, especialmente os relacionados à resposta imunológica, e assim compreendermos melhor o funcionamento da interação parasito-hospedeiro e desenvolver possíveis estratégias de controle. |