Melhoramento genético da levedura Saccharomyces cerevisiae para produção de bioetanol de segunda geração

Abstract

O bioetanol de segunda geração (E2G) é considerado uma alternativa sustentável aos combustíveis fósseis, sendo produzido a partir de biomassa lignocelulósica. Esse processo envolve várias etapas, incluindo pré-tratamento, hidrólise enzimática, fermentação e destilação. Um dos principais obstáculos enfrentados na produção de E2G é a geração de compostos inibitórios durante o pré-tratamento da biomassa, os quais dificultam a fermentação pelas leveduras. O presente projeto teve como objetivo a sobre-expressão de genes relacionados a uma proteína quinase e a uma proteína de membrana na linhagem industrial recombinante de Saccharomyces cerevisiae, buscando aprimorar a tolerância da levedura a esses compostos inibitórios. As técnicas utilizadas incluíram a extração de DNA genômico, PCR, eletroforese, purificação de DNA e transformação da levedura. No entanto, os resultados iniciais não foram bem-sucedidos, pois a linhagem industrial apresentou alta tolerância ao antibiótico utilizado no processo de seleção, o que exigiu uma revisão da estratégia, com a substituição do gene de seleção por outro que conferisse resistência a um antibiótico diferente.