Análise proteômica do secretoma de células estromais mesenquimais dermais expostas à radiação ultravioleta B

Abstract

As células estromais mesenquimais (CEMs) são conhecidas por suas funções parácrinas, modulando o microambiente através da secreção de moléculas bioativas que influenciam o estresse oxidativo, inflamação e reparo tecidual. O presente estudo buscou explorar os efeitos da radiação ultravioleta B (UVB) no secretoma de CEMs dermais, através de análise proteômica. As CEM-d foram categorizadas em três grupos: controle, grupo exposto a UVB com dose de 2.5mJ/cm² e com 5mJ/cm². Após passarem 48h em DMEM com privação de soro fetal bovino, o meio condicionado (MC) das CEM-d foi coletado e concentrado. As análises a partir do proteoma foram realizadas utilizando espectrometria de massa, com identificação e quantificação proteica através da plataforma Maxquant. Foram selecionadas proteínas com pelo menos dois peptídeos únicos para a execução de análises de ontologia gênica (GO), com o software g:Profiler. Os resultados mostraram 363 proteínas identificadas , sendo 66,5% comuns em todos os grupos experimentais, com distribuição similar, estando predominantemente no espaço extracelular (aproximadamente 85%). As análises de GO referentes a funções moleculares mostraram que todos os secretomas foram enriquecidos com proteínas relacionadas a constituintes estruturais de matriz extracelular (MEC), com 16% no MC-CTL em comparação a 14% e 12% no MC-UVB2.5 e MC-UVB5.0, respectivamente. Em relação a proteínas diferentemente expressas, as análises mostraram que entre o MC-CTL e o MC-UVB2.5, 176 proteínas foram up-reguladas e 67 down-reguladas. Já entre o MC-CTL e o MC-UVB5.0, 147 proteínas foram up-reguladas e 100 down-reguladas. Esses dados sugerem que apesar de terem sido encontradas análises de enriquecimento similares entre si, as diferenças nas expressões proteicas foram evidenciadas, indicando respostas variáveis de acordo com o nível de exposição à UVB. Os próximos estudos terão como foco as proteínas diferentemente expressas para entender seu papel no reparo tecidual e seus mecanismos de respostas ao fotodano.