Identificação de genótipos associados à musculatura dupla em reprodutores da raça Braford

Abstract

A proteína Miostatina desempenha um papel fisiológico fundamental no controle do crescimento muscular, sendo especialmente relevante na produção de carne e na reprodução de bovinos. A seleção e os cruzamentos dirigidos para o desenvolvimento de certas raças resultaram na expressão de alelos que inibem a função da Miostatina, o que, entre outros efeitos, causa hipertrofia muscular, caracterizando o fenótipo conhecido como dupla musculatura (DM) nos animais que carregam esses alelos. Dentre esses, os alelos C (selvagem) e A (mutado) se destacam, com o alelo A estando associado ao fenótipo DM. A Associação Brasileira de Hereford e Braford (ABHB) possui técnicos que avaliam os animais animais por análise visual e genealógica. Animais que exibem DM de forma fenotípica não atendem aos padrões raciais estabelecidos pela associação, o que impede seu registro como reprodutores. Este estudo teve como objetivo identificar a presença de genótipos distintos para o gene da Miostatina, visando a criação de uma ferramenta de genotipagem que permita a identificação, logo ao nascimento, de indivíduos que portam os genótipos associados à DM. Foram analisados 29 animais da raça Braford, pertencentes ao rebanho da Fazenda Experimental da Ressacada – UFSC. Após a extração do DNA a partir de amostras de sangue coletadas dos animais, a região correspondente ao Éxon - I do gene da Miostatina foi isolada e amplificada por meio da técnica de Reação em Cadeia da Polimerase (PCR). As genotipagens foram realizadas utilizando a técnica de Polimorfismo de Tamanho de Fragmentos de Restrição (RFLP) com as endonucleases Pvu-II e Taq-I, para verificar a possível existência de polimorfismos na região de interesse. As análises utilizando a endonuclease Pvu-II indicaram que a região estudada do gene da miostatina possuía dois sítios de corte da referida enzima em todos os animais avaliados, observando-se três fragmentos visíveis em UV em todas as amostras e caracterizando um padrão monomórfico. Já os resultados obtidos com as análises de RFLP utilizando-se a enzima Taq-I, permitiram a identificação de polimorfismo genético. Foram identificados três padrões de migração distintos, caracterizando os genótipos CC com duas bandas visíveis em UV e CA, com três bandas. As frequências genotípicas correspondentes aos genótipos CC e CA identificados foram iguais a 0,931 e 0,069, respectivamente. As frequências alélicas obtidas (C = 0,9655 / A = 0,0345) foram testadas quanto à aderência ao equilíbrio de Hardy-Weinberg (Qui-quadrado a 5% de significância) e mostraram-se em equilíbrio. Isso pode ser atribuído ao tamanho da amostra de animais testados ou à seleção fenotípica contra DM em bovinos da raça Braford. Os resultados obtidos possibilitaram a padronização de uma técnica de marcação molecular que pode ser utilizada pela associação da raça para a identificação precoce de animais portadores de alelos associados à dupla musculatura em bovinos da raça Braford.