Investigação do efeito antinociceptivo e anti-inflamatório do composto p-metoxi aril-ciclohexanona 35 em camundongos

Abstract

Introdução: Os estudos sobre dor têm buscado novas moléculas que possam atuar de forma eficiente no seu controle. Os canabinoides e seus derivados sintéticos têm se mostrado promissores nessa área. Na síntese de aril-ciclohexanonas, com semelhança estrutural a fitocanabinoides como o canabidiol (CBD), encontra-se o composto p-metoxi aril-ciclohexanona 35 (LP171). Desta forma, o presente estudo visa investigar os efeitos toxicológicos e terapêuticos do composto LP171 em modelos de dor aguda em camundongos. Métodos: Foram utilizados camundongos Swiss machos e fêmeas. O potencial antinociceptivo e anti-inflamatório do LP171 (0,1, 1 e 10 mg/kg, por via intragástrica (i.g.) ou intraperitoneal) foi avaliado no modelo de hiperalgesia térmica com placa quente, e hiperalgesia mecânica e edema induzida por formalina e carragenina (CG). Os animais que receberam CG tiveram suas patas removidas e avaliadas quanto aos níveis de interleucinas (interleucina-1ß e interleucina-6) por ensaio imunoenzimático (ELISA, do inglês enzyme-linked immunosorbent assay). Além disso foi avaliado o estresse oxidativo, verificando-se as atividades de glutationa reduzida (GSH), substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS) e nicotinamida adenina dinucleotídeo fosfato oxidases (NADPH). A avaliação da toxicidade oral aguda foi realizada seguindo o guia 425 da Organização para Cooperação e Desenvolvimento Econômico (OCDE). A atividade locomotora foi avaliada com o campo aberto. A investigação do envolvimento do mecanismo ação envolvendo sistema endocanabinoide foi investigado no modelo de formalina, utilizando agonistas e antagonistas canabinoides. Dexametasona, canabidiol e morfina foram utilizados como controles positivos para as avaliações. Resultados: O LP171 não apresentou sinais de toxicidade nem mortalidade em nenhuma das doses propostas nos estudos de toxicidade aguda, sem alterar o peso dos animais ou macroscopicamente os órgãos. O composto não gerou alteração na locomoção dos animais, e na dose de 10 mg/kg foi capaz de reduzir a hiperalgesia térmica. Além disso, o LP171 reduziu a nocicepção e edema de pata induzidos por formalina na fase neurogênica e inflamatória, bem como no modelo de inflamação induzida por CG. Além disso, reduziu os níveis de IL1-ß e de TBARS, e aumentou os níveis de GSH. Entretanto, os efeitos observados não foram provenientes da ativação de receptores canabinoides quando o composto é administrado por via i.g. Conclusão: Em conjunto, estes dados fornecem evidências preliminares sobre a segurança para o uso de LP171, além de identificar importantes efeitos antinociceptivos, anti-inflamatórios e antioxidantes em modelos de dor aguda em camundongos. Desta forma, os resultados apresentados abrem caminhos para maiores investigações sobre o composto p- metoxi aril-ciclohexanona 35 e reforça o potencial terapêutico proveniente de moléculas sintéticas para o manejo da dor.

Abstract: Introduction: Research on pain has been seeking new molecules that can effectively contribute to its management. Cannabinoids and their synthetic derivatives have shown promise in this area. In the synthesis of aryl-cyclohexanones, which have structural similarity to phytocannabinoids such as cannabidiol (CBD), the compound p- methoxy aryl-cyclohexanone 35 (LP171) is found. Thus, the present study aims to investigate the toxicological and therapeutic effects of the compound LP171 in acute pain models in mice. Methods: Male and female Swiss mice were used. The antinociceptive and anti-inflammatory potential of LP171 (0.1, 1, and 10 mg/kg, administered intragastrically (i.g.) or intraperitoneally) was evaluated in a thermal hyperalgesia hot plate model, and mechanical hyperalgesia and edema induced by formalin and carrageenan (CG). The animals that received CG had their paws removed and assessed for interleukin levels (interleukin-1ß and interleukin-6) through an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Additionally, oxidative stress was evaluated by measuring reduced glutathione (GSH), thiobarbituric acid reactive substances (TBARS), and nicotinamide adenine dinucleotide phosphate oxidases (NADPH). Acute oral toxicity assessment was performed following the guidelines of the Organization for Economic Co-operation and Development (OECD) guide 425. Locomotor activity was assessed using an open field test. The involvement of mechanisms related to the endocannabinoid system was investigated in the formalin model using cannabinoid agonists and antagonists. Dexamethasone, cannabidiol, and morphine were used as positive controls for the assessments. Results: LP171 showed no signs of toxicity or mortality at any of the proposed doses in the acute toxicity studies, with no changes in animal weight or macroscopic alterations in organs. The compound did not affect locomotion and, at a dose of 10 mg/kg, was able to reduce thermal hyperalgesia. Moreover, LP171 reduced paw nociception and edema induced by formalin during both the neurogenic and inflammatory phases, as well as in the CG- induced inflammation model. Additionally, it reduced IL-1ß and TBARS levels and increased GSH levels. However, the observed effects were not due to cannabinoid receptor activation when the compound was administered i.g. Conclusion: Together, these data provide preliminary evidence on the safety of using LP171, as well as identifying significant antinociceptive, anti-inflammatory, and antioxidant effects in acute pain models in mice. Therefore, the presented results pave the way for further investigations into the compound p-methoxy aryl-cyclohexanone 35 and reinforce the therapeutic potential of synthetic molecules for pain management.