Detecção de DNA humano em mosquitos (Diptera: Culicidae) após alimentação sanguínea

Abstract

Os mosquitos podem ser utilizados na entomologia forense por armazenar DNA humano em seu trato gastrointestinal após a hematofagia, tornando-se uma importante ferramenta na obtenção de perfis genéticos, sendo possível a identificação de uma vítima, de um possível criminoso e/ou a exclusão de um suspeito, o que pode auxiliar em investigações criminais. O objetivo deste trabalho foi determinar o intervalo máximo de tempo em que o DNA humano permanece detectável no aparelho digestivo de mosquitos e o número mínimo de indivíduos necessário para a recuperação eficaz desse material genético. Para isso, analisou-se o conteúdo genético presente no trato gastrointestinal de 72 fêmeas de Aedes aegypti após 0h, 12h, 24h, 36h, 48h, 60h, 72h e 96h do repasto sanguíneo, em pools de 1, 3 e 5 indivíduos em cada tempo de coleta. O DNA foi extraído utilizando o Blood-Animal-Plant DNA Preparation Kit (Cellco®) e amplificado por reação em cadeia da polimerase (PCR) com o uso de um marcador mitocondrial (fragmento do gene citocromo B). A visualização dos produtos de PCR foi realizada por eletroforese em gel de agarose, com registro das bandas sob transiluminador de luz UV. Os resultados demonstraram a possibilidade da recuperação de DNA humano em A. aegypti com amplificação bem-sucedida nos tempos de 0h, 12h, 24h, 36h e 48h. Não houve detecção nos tempos de 60h e 72h. Observou-se ainda amplificação positiva em um pool de 3 mosquitos no tempo de 96h, indicando que, embora menos provável, ainda é possível recuperar moléculas de DNA mitocondrial nesse intervalo de digestão sanguínea. Esses resultados reforçam o potencial forense dos mosquitos como fontes complementares de evidências biológicas em investigações criminais.

Mosquitoes can be used in forensic entomology because they store human DNA in their gastrointestinal tract after hematophagy, becoming an important tool for obtaining genetic profiles and enabling the identification of a victim, a possible perpetrator, and/or the exclusion of a suspect, thereby assisting criminal investigations. The aim of this study was to determine the maximum time interval during which human DNA remains detectable in the digestive tract of mosquitoes and the minimum number of individuals required for the efficient recovery of this genetic material. For this purpose, the genetic content present in the gastrointestinal tract of 72 Aedes aegypti females was analyzed at 0h, 12h, 24h, 36h, 48h, 60h, 72h, and 96h after the blood meal, in pools of 1, 3, and 5 individuals at each collection time. DNA was extracted using the Blood-Animal-Plant DNA Preparation Kit (Cellco®) and amplified by polymerase chain reaction (PCR) with a mitochondrial marker (fragment of the cytochrome B gene). Visualization of the PCR products was performed by agarose gel electrophoresis, with band recording under a UV transilluminator. The results demonstrated the possibility of recovering human DNA from A. aegypti, with successful amplification observed at 0h, 12h, 24h, 36h, and 48h, while no amplification was detected at 60h and 72h. A positive amplification was also observed in one pool of three mosquitoes at 96h, indicating that, although less likely, it is still possible to recover amplifiable mitochondrial DNA molecules at this stage of blood digestion. These findings reinforce the forensic potential of mosquitoes as complementary sources of biological evidence in criminal investigations.