Extração, recuperação e atividade da alfa-quimiotripsina em sistemas de micelas reversas

Abstract

Neste trabalho, estudou-se a transferência reversa de a-quimiotripsina (a-CT) em sistemas de micela reversa com diferentes surfactantes (AOT, lecitina de soja- SbPC, C12E4 e CTAB), para a fase aquosa receptora de NaOH contendo 2,5% de etanol O pH da solução aquosa de a-CT injetada na solução orgânica, influenciou no processo de transferência, em pH 7,7 obteve-se valores mais elevados. A determinação do teor protéico na fase aquosa após a transferência, foi realizada através do método de Lowry. A reação de hidrólise do n-glutaril-L-fenilalanina-p-nitroanilida - GPNA em meio de micela reversa de AOT catalisada pela a-CT obedece a cinética de Michaelis-Menten na faixa de [GPNA] = 0,056 ´ 10-5 - 1,110 ´ 10-5 M. O valor da KM e a Vmáx obtidas foram 6,83 ´ 10-5 M e 3,68 ´ 10-4 s-1, respectivamente. A desidratação da solução de micela reversa de AOT/heptano contendo a-CT, foi realizada através do equilíbrio da fase vapor da solução micelar com LiCl umedecido. A atividade catalítica da a-CT em pH 7,0; 7,7; 8,2 e 9,0, durante o processo de desidratação, diminuiu e aumentou após a re-hidratação do sistema, mostrando que a enzima não foi desnaturada, permanecendo em estado "dormente". Esta propriedade é extremamente importante para a indústria alimentícia e farmacêutica na obtenção de aroma instáveis.