Estudo da cinética do infiltrado celular inflamatório induzido por adjuvantes de vacinas em bolhas de ar formadas no subcutâneo de camundongos

Abstract

A inflamação é uma resposta do organismo a um estímulo agressor, químico, físico ou biológico, que tem como finalidade restaurar a integridade tecidual. Este fenômeno biológico é realizado através do acúmulo e ativação de leucócitos no local da injúria, que contribuem para a eliminação de antígenos e recuperação da homeostase. A inflamação é, também, fundamental para o estabelecimento da imunidade específica e eficiência da imunização. Uma das medidas de imunização mais eficaz é a vacinação. Uma vacina deve ter alto poder imunogênico para ser eficaz na profilaxia de doenças infecto-contagiosas. Desta forma, elas são geralmente associadas a substâncias adjuvantes, que amplificam a resposta protetora da vacina. Entretanto, alguns destes adjuvantes induzem efeitos indesejáveis, tais como excesso de inflamação local e sinais flogísticos sistêmicos. O presente estudo pretendeu verificar a atividade inflamatória induzida por seis adjuvantes, associados a uma vacina contra vírus rábico para futuro uso em animais. Os adjuvantes testados neste trabalho foram o Algamulin, Avridine, Hidróxido de Alumínio, b-Glucana (2 e 4 mg), SEPPIC-I e SEPPIC-II. Para este objetivo as diferentes formulações adjuvantes (50µl) adicionadas à vacina (50µl), a vacina pura (50µl) e PBS (Controle) foram inoculados em uma bolha de ar (3ml) formada do dorso (subcutâneo) de camundongos albinos da linhagem Swiss. Após 24 e 72 horas do desafio, os animais foram sacrificados e o conteúdo celular obtido da cavidade foi associado à intensidade do processo inflamatório. A contagem total de células leucocitárias e suas subpopulações foi realizada por Citometria de Fluxo. Para a análise de subpopulações, os leucócitos foram preparados e marcados, conforme o protocolo da PharMingen®, com anticorpos conjugados com fluoresceína ou ficoeritrina-R, específicos para as populações de Linfócitos B (anti-CD 19), Linfócitos T (anti-CD 3) e sub-população de Linfócitos T (anti-CD 4 e anti-CD 8). Nossos resultados permitem concluir que: 1. Todos os adjuvantes induzem inflamação cutânea; 2. Existe diferença de intensidade e na qualidade do infiltrado inflamatório induzido entre os diferentes adjuvantes utilizados. Alguns adjuvantes induzem um infiltrado inflamatório predominantemente de células mononucleares, Outros de polimorfonucleares; 3. Estas diferenças parecem resultar em padrões de resposta imune diferentes, de acordo com a célula mais estimulada. Os padrões de resposta predominantemente mononuclear foram observados com SEPPIC-I e SEPPIC-II. O Padrão de resposta apresentando grande quantidade de células polimorfonucleares foi observado com Hidróxido de Alumínio, Algamulin e Beta Glucana; 4. Avridine apresentou um infiltrado misto no qual havia a presença tanto de células mononucleares quanto polimorfonucleares;