Importância da investigação de proteínas de resistência ABCB1, ABCC1 e LRP e da proteína antiapoptótica Bcl-2 no diagnóstico e no prognóstico de leucemias agudas

Abstract

A resistência a múltiplas drogas é uma das maiores causas para a falha do tratamento das leucemias agudas (LA). A resistência adquirida ou intrínseca a múltiplas drogas (MDR) depende de muitas variáveis biológicas e é principalmente caracterizada pela resistência cruzada a uma ampla variedade de fármacos não relacionados estrutural e funcionalmente. Vários mecanismos podem estar envolvidos no fenômeno MDR, como o mecanismo de efluxo de drogas através da membrana plasmática e as alterações nos mecanismos que regulam a morte celular por apoptose. Assim, o objetivo desse trabalho foi analisar o perfil de expressão das proteínas relacionadas à resistência a múltiplas drogas (ABCB1, ABCC1 e LRP) e à apoptose (Bcl-2) em células blásticas de pacientes com leucemia aguda (LA), ao diagnóstico, atendidos pelo Serviço de Hematologia do Hospital Universitário da Universidade Federal de Santa Catarina (HU-UFSC) e pelo Serviço de Oncologia do Hospital Infantil Joana de Gusmão (HI-Florianópolis) no período de Janeiro de 2008 a Dezembro de 2009. Para tanto, as células blásticas dos adultos e crianças com LA foram separadas por gradiente de densidade com Ficoll-Hypaque e a expressão dos genes e das proteínas de resistência foram avaliadas por RT-PCR semiquantitativo e citometria de fluxo, respectivamente. A média da expressão relativa de todas as amostras foi utilizada como ponto de corte para superexpressão. Tanto os pacientes adultos quanto as crianças apresentam uma ampla variedade de expressão para as proteínas estudadas. Os pacientes adultos com LA apresentaram correlação significativa entre a expressão dos genes abcb1 e lrp e a expressão das proteínas ABCB1 e ABCC1, ABCB1 e Bcl-2, e ABCC1 e Bcl-2 e nos pacientes pediátricos com LA não houve correlação significativa entre os níveis de expressão de dos genes e proteínas estudados. Nos pacientes adultos com LA, houve correlação positiva entre a expressão do gene abcb1 e a idade dos pacientes, e a concentração de LDH, enquanto nos pacientes pediátricos com LA, houve correlação positiva entre a expressão do gene abcc1 e a expressão de CD34, entre a expressão da proteína LRP e a idade, e entre a expressão da proteína ABCB1 e a leucometria ao diagnóstico. Esses resultados sugerem que a análise da expressão gênica de abcb1 está mais relacionada com um pior prognóstico nos pacientes adultos com LA, enquanto que nos pacientes com LA infantil, é a expressão conjunta das proteínas ABCB1, ABCC1 e LRP que parece estar relacionada com um pior prognóstico. Além disso, os resultados também indicam que a determinação do perfil de expressão da ABCB1, ABCC1 e LRP pelo método do RT-PCR semiquantitativo é mais significativa nos casos de LA em adultos e a determinação do perfil de expressão dessas proteínas por citometria de fluxo é mais significativa nas LAs em crianças