Citometria de DNA como método diagnóstico em odontologia

Abstract

A citometria baseada em luz é um método diagnóstico que consiste em analisar amostras obtidas através da citologia esfoliativa, pela mensuração da intensidade do pigmento e resistência que este oferece à passagem de luz proveniente do microscópio óptico. Dessa forma, gera-se um algoritmo referente a esta resistência à luz que categoriza os tipos de alterações genéticas, sobretudo as aneuploidias, e as expressa em números através dos índices de densidade óptica integrada (IOD), DNA index (DI) e excedentes de 5c, presentes no contingente da amostra. Essa mensuração do DNA, provida pela citometria, busca a pesquisa de clones aneuploides na amostra, os quais são conhecidos como indicadores primordiais do processo de instabilidade genômica e danificação da maquinaria mitótica celular. A presença desse fenômeno biológico, após anos de observação e estudo, foi consolidada por diversos autores como um fator estimulante da carcinogênese e promotor da piora prognóstica em vários aspectos dos carcinomas, em diversos sítios humanos, inclusive no carcinoma epidermóide bucal. Essa revisão de literatura foi concebida através da pesquisa bibliográfica, realizada principalmente, a partir da base de dados “Pubmed”,excluindo qualquer restrição quanto à data de publicação dos artigos utilizados e objetivando sempre apresentar as informações mais atuais acerca de como a citometria de DNA – sobretudo, a baseada em luz – pode ser utilizada no diagnóstico de lesões da cavidade oral. Bem como discutir e exemplificar etapas do método, desde a preparação e extração de amostras, até sua análise interpretação dos dados obtidos para diagnóstico e consequente impacto nas intervenções de tratamento e proservação. Além de demonstrar os valores preditores e propriedades de acurácia da citometria de DNA e da biópsia e elucidar quais os principais benefícios e desafios da incorporação dessa técnica ao cotidiano clínico odontológico. A citometria de DNA, apesar de possuir potencial promissor no que tange ao diagnóstico do câncer, ainda carece de estudos que se aprofundem nos campo do câncer oral, especificamente. Isso, portanto, justifica a realização desse trabalho, com a divulgação e discussão dos conhecimentos consolidados até o presente momento a despeito do assunto.

Image based cytometry is a diagnostic method that consists of analyzing samples obtained through exfoliative cytology, by measuring the intensity of the pigment and the resistance it offers to the passage of light from the optical microscope. An algorithm related to this light resistance is generated, which categorizes the types of genetic alterations, especially aneuploidies, and expresses them in numbers through the indices of integrated optical density (IOD), DNA index (DI) and excess of 5c, present in the sample quota. This DNA measurement, provided by cytometry, essentially seeks to search for aneuploid clones in the sample, which were reported to be primary indicators of the process of genomic instability and damage to the cellular mitotic machinery. The presence of this biological phenomenon, after years of observation and study, has been consolidated by several authors as a stimulating factor for carcinogenesis and a promoter of poor prognosis in many aspects of carcinomas, in several human sites, including oral squamous cell carcinoma. This literature review was conceived through bibliographic research, carried out especially from the “Pubmed” database, without any restriction concerning the articles’ publication’s date, always intending to present the most current information about how DNA cytometry – especially image based – can be used in the diagnosis of oral cavity lesions, as well as to discuss and exemplify steps of the method, from the preparation and extraction of samples, to their analysis, interpretation of the data obtained for diagnosis and consequent impact on treatment and follow-up interventions. In addition to demonstrate the predictive values and accuracy properties of DNA cytometry and biopsy, and elucidating the main benefits and challenges of incorporating this technique into daily clinical dentistry. Despite having promising potential regarding to the diagnosis of oral cancer related to DNA cytometry, there are still few studies focusing on the oral application of this technic, which justifies, therefore, the realization of this work, with the discussion and dissemination of the subject.