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Abstract:
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Os gliomas se originam majoritariamente de células gliais e constituem 80% dos tumores cerebrais primários malignos. O gliobastoma multiforme (GBM; grau 4) é um glioma infiltrativo, agressivo e de alta letalidade. O tratamento do GBM consiste na ressecção cirúrgica do tumor seguida de quimioterapia com temozolamida, combinada à radioterapia. Devido a diversas características do GBM, esse tratamento tem eficiência limitada, resultando numa sobrevida média dos pacientes de cerca de quinze meses. Diante disso, o estudo de novas abordagens terapêuticas é fundamental. O transportador 1 de aminoácidos tipo-L (LAT-1; SLC7A5), associado a glicoproteína CD98 (4F2hc; SLC3A2), é responsável pela captura de aminoácidos neutros, especialmente leucina. Este sistema é expresso em células tumorais e sua inibição tem sido apontada como estratégia terapêutica em vários tipos de câncer. Entretanto, a ação de inibidores de LAT1 ainda não foi bem caracterizada no tratamento de gliomas. Este trabalho teve como objetivo avaliar a ação antiglioma do inibidor seletivo de LAT-1, JPH203, isoladamente ou associado à ConBr, uma lectina extraída das sementes de Canavalia brasiliensis. ConBr já demonstrou previamente promover morte seletiva em células de glioma, possivelmente via interação com glicanos de CD98 e inibição do sistema Xc-. Neste estudo, células de glioma C6 foram tratadas com JPH203 e/ou ConBr, seguido da avaliação dos seguintes parâmetros: (i) viabilidade celular, através do teste de MTT; (ii) autofagia, através da coloração com laranja de acridina e microscopia de fluorescência, para detecção de organelas vesiculares ácidas (OVAs), bem como detecção da proteína LC3I/II por western blot; (iii) vias de sobrevivência celular, PI3K/Akt, através de western blot. Os resultados demonstraram que tanto JPH203 (50 µM) quanto ConBr (0,3 µM; 30 μg/mL) apresentaram efeito citotóxico significativo sobre as células de glioma C6. JPH203 induziu a formação de OVAs e aumentou a expressão de LC3-II após 24 h, indicando ativação da autofagia. Após 48 h JPH203 também diminuiu a viabilidade celular. A lectina ConBr promoveu aumento de OVAs e inibiu a fosforilação de Akt. A combinação dos dois tratamentos apresentou efeito citotóxico relevante, mas não houve sinergismo. Os tratamentos combinados também inibiram a fosforilação de Akt, uma via crucial para a sobrevivência, proliferação e regulação da autofagia. Conclui-se que JPH203 e ConBr apresentam potencial antiglioma, ativando a autofagia e inibindo vias de sinalização associadas à sobrevivência celular. Esses achados contribuem para compreensão dos mecanismos moleculares envolvidos na modulação de gliomas e reforçam a importância da investigação de novos alvos terapêuticos para o tratamento de gliomas. |
