Investigação do efeito citotóxico das imidazopiridinas DSH55 e DSH56 sobre células de leucemia aguda.

Abstract

Entre as neoplasias hematológicas as leucemias mielóides agudas (LMA) se caracterizam por um bloqueio de maturação e proliferação descontrolada de progenitores mielóides na medula óssea, os quais podem infiltrar o sangue periférico e/ou outros tecidos. Essas doenças se destacam pela elevada prevalência no Brasil e no mundo, e, apesar dos avanços no tratamento, a quimioterapia ainda é a forma de terapia mais utilizada. No entanto, está associada a elevada citotoxicidade e efeitos adversos que levam a altas taxas de morbidade e mortalidade. Sendo assim, a busca por novos compostos para o desenvolvimento de fármacos para o tratamento LMA é de grande interesse para a indústria farmacêutica. Nessa perspectiva, e tendo em vista as diversas atividades biológicas já descritas sobre compostos da classe das imidazopiridinas, incluindo atividade antineoplásica, o objetivo deste estudo foi avaliar a atividade citotóxica das imidazopiridinas DSH55 e da DSH56, sobre células de linhagem de LMA (K562). O efeito citotóxico dos compostos sobre a K562 foi analisado pelo método de MTT. Os resultados mostram que ambos os compostos diminuíram significativamente a viabilidade celular de forma tempo e concentração dependentes. Além disso, para avaliar a capacidade dos compostos causar hemólise, eritrócitos de indivíduos saudáveis foram incubados a concentrações crescentes, até cinco vezes maior que a CI50 de cada composto, e, foi observado que, quando comparado ao controle negativo, não houve diferença significativa na liberação de hemoglobina. Além disso, por meio da análise da morfologia das células coradas com brometo de etídio e laranja de acridina e detecção da exposição de resíduos de fosfatidilserina por citometria de fluxo, foi observado que o mecanismo de morte celular induzido pelas imidazopiridinas DSH55 e DSH56 envolve apoptose. Em conjunto, os resultados obtidos permitem sugerir que as imidazopiridinas DSH55 e da DSH56 causam apoptose na células nas células K562, no entanto, para um avanço no desenvolvimento dessas moléculas como possíveis protótipos de novos fármacos, será necessário a avaliação de outras proteínas envolvidas no mecanismo de ação da apoptose.

Among all hematologic neoplasms, acute myeloid leukemias (AML) are characterized by a blockage in maturation and uncontrolled proliferation of myeloid progenitors located in the bone marrow; these can escape the bone marrow towards peripheral tissues such as the blood. These diseases are known for their significant prevalence in Brazil and around the world, nevertheless, even with some advancements in treatments, chemotherapy is still the most often used treatment. However, it’s frequently associated with high toxicity and side-effects that lead to morbidity and mortality. With that in mind, research for new compounds aiming in the development of drugs for the treatment of AML is of high interest for the pharmaceutical industry. From this point of view, and minding all biological activities reported for other imidazopyridines, including antineoplastic, the aim of this paper was to evaluate the cytotoxicity of DSH55 and DSH56, two imidazopyridines, over a AML cell line (K562). Cytotoxicity was assessed using MTT. Results have shown that both compounds have significantly diminished cell viability in a time-dose dependent manner. Furthermore, in order to test for hemolysis potential, healthy erythrocytes were incubated with a gradient of concentrations, up to five-fold each compound’s IC50 , and, compared to an untreated control, there were no significant differences in hemoglobin liberation. Beyond that, using ethidium bromide and acridine orange the morphology was evaluated as well as the exposition of phosphatidylserine residues by flow cytometry. Combined, these results allow us to suggest that the cell death mechanism induced by DHS55 and DSH56 in K562 cells involves apoptosis, nevertheless, in order to strengthen this claim other proteins involved with apoptosis should be evaluated.